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        常見熒光蛋白的激發波長和發射波長

        作者:上海峰志儀器 時間:2020-08-03 10:45:38瀏覽26293 次

        信息摘要:

        運用熒光蛋白可以觀測到細胞的活動,可以標記表達蛋白,可以進行深入的蛋白質組學實驗等等。特別是在癌癥研究的過程中,由于熒光蛋白的出現使得科學家們能夠觀測到腫瘤細胞的具體活動,比如腫瘤細胞的成長、入侵、轉移和新生。

        利用熒光蛋白可以觀測到細胞的活動,可以標記表達蛋白,可以進行深入的蛋白質組學實驗等等。特別是在癌癥研究的過程中,由于熒光蛋白的出現使得科學家們能夠觀測到腫瘤細胞的具體活動,比如腫瘤細胞的成長、入侵、轉移和新生。 

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        GFP熒光蛋白在煙草葉片上的表達(LUYOR-3415RG激發光源照射下的觀察效果)

        綠色熒光蛋白GFP和eGFP

        綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein,簡稱GFP),是一個由約238個氨基酸組成的蛋白質,從藍光到紫外線都能使其激發,發出綠色螢光。雖然許多其他海洋生物也有類似的綠色熒光蛋白,但傳統上,綠色熒光蛋白(GFP)指首先從維多利亞多管發光水母中分離的蛋白質。這種蛋白質zui早是由下村修等人在1962年在維多利亞多管發光水母中發現。這個發光的過程中還需要冷光蛋白質水母素的幫助,且這個冷光蛋白質與鈣離子可產生交互作用。

        藍色和青色熒光蛋白(BFP和CFP)

        藍色和青色熒光蛋白變種是將綠色熒光蛋白的66位的酪氨酸殘基突變為組氨酸形成的。這一轉變使藍色發射光更大波長為450nm,而突變為色胺后,熒光的峰值在480nm。這兩個熒光蛋白的熒光都很弱,需要改造來提高折疊效率和熒光亮度。盡管進行了改造,兩者的熒光蛋白亮度僅為增強型綠色熒光蛋白的25-40%。除此之外,藍色和青色熒光蛋白在不常用的光譜區應用起來很有效,所以需要特殊的濾光片和激光光源。除了以上缺點,在多顏色熒光標記和FRET實驗中這兩種熒光蛋白得到了較多的應用。尤其是增強型青色熒光蛋白,可以被氬離子激光激發脫離峰值(用457nm光譜線),而且比藍色衍生物更能抵抗光漂白作用。跟其他熒光蛋白相比,對可見光藍色區域的熒光蛋白并沒有引起很高的重視,在這一組熒光蛋白中主要研究集中在青色熒光蛋白中。

        黃色熒光蛋白YFP

        黃色熒光蛋白,又稱YFP, Yellow Fluorescent Protein.黃色熒光蛋白又稱Recombinant YFP Protein, YFP Protein, h-YFP Protein, rh-YFP Protein, recombinant human YFP Protein, YFP等.

        紅色熒光蛋白RFP

        Red fluorescent protein簡稱RFP,RFP紅色熒光蛋白的激發光峰值為532nm,RFP紅色熒光蛋白的熒光峰值為588nm。
        常規紅色熒光蛋白分為橙色熒光蛋白(550-570 nm),紅色熒光蛋白(570-620 nm)和遠紅外熒光蛋白(>620 nm)3 種。mCherry是作為標簽的好選擇,因為它的光穩定性更強并且其具備良好的單體特性,細胞毒性低。DsRed是一種從珊瑚中分離出來的紅色熒光蛋白,具有熒光強、穩定性好等優勢。但其本身也存在許多問題。例如,DsRed 寡聚狀態是四聚體,在進行蛋白融合時容易形成多聚影響目標蛋白,DsRed 在細胞內表達會產生毒性。
        Red fluorescent protein (RFP) is a versatile biological marker for monitoring physiological processes, visualizing protein localization, and detecting transgenic expression in vivo. RFP can be excited by the 488 nm or 532 nm laser line and is optimally detected at 588 nm.

        下圖為各種熒光蛋白的激發表達效果圖(采用LUYOR-3415RG激發)

        各種熒光蛋白的表達效果圖

        熒光蛋白的激發波長和發射波長

        熒光蛋白名稱

        激發波長
             (nm)

        發射波長
             (nm)

        摩爾
             消光
             系數

        光量子

        結構

        相對亮度
             (EGFP的百分比)

        GFP (wt)395/47550921,0000.77單體48
        綠色熒光蛋白(GFP、avGFP、EGFP和mEGFP綠色熒光蛋白的區別
        EGFP48450756,0000.60單體100
        Emerald487509575.000.68單體116
        Superfolder GFP48551083.3000.65單體160
        Azam Green49250555,0000.74單體121
        mWasabi49350970,0000.80單體167
        TagGFP48250558,2000.59單體110
        TurboGFPGFP48250270,0000.53二聚體102
        AcGFP48050550,0000.55單體82
        ZsGreen49350543,0000.91四聚體117
        T-Sapphire39951144,0000.60單體79
        藍色熒光蛋白
        EBFP38344529,0000.31單體27
        EBFP238344832,0000.56單體53
        Azurite38445026,2000.55單體43
        mTagBFP39945652,0000.63單體98
        青色熒光蛋白
        ECFP43947632,5000.40單體39
        mECFP43347532,5000.40單體39
        Cerulean43347543,0000.62單體79
        CyPet43547735,0000.51單體53
        AmCyan145848944,0000.24四聚體31
        Midori-Ishi Cyan47249527,3000.90二聚體73
        TagCFP45848037,0000.57單體63
        mTFP1 (Teal)46249264,0000.85單體162
        黃色熒光蛋白
        EYFP51452783.4000.61單體151
        Topaz51452794,5000.60單體169
        Venus51552892,2000.57單體156
        mCitrine51652977,0000.76單體174
        YPet517530104,0000.77單體238
        TagYFP50852464,0000.60單體118
        PhiYFP525537124,0000.39單體144
        ZsYellow152953920,2000.42四聚體25
        mBanana5405536,0000-7單體13
        橙色熒光蛋白
        Kusabira Orange54855951,6000.60單體92
        Kusabira Orange255156563.8000.62單體118
        mOrange54856271,0000.69單體146
        mOrange254956558,0000.60單體104
        Tdomato55458169,0000.69二聚體142
        dTomato-Tandem554581138,0000.69單體283
        TagRFP555584100,0000.48單體142
        TagRFP-T55558481,0000.41單體99
        DsRed55858375,0000.79四聚體176
        DsRed256358243.8000.55四聚體72
        DsRed-Express (T1)55558438,0000.51四聚體58
        DsRed-Monomer55658635,0000.10單體10
        mTangerine56858538,0000.30單體34
        紅色熒光蛋白
        mRuby558605112,0000.35單體117
        mApple56859275,0000.49單體109
        mStrawberry57459690,0000.29單體78
        AsRed257659256,2000.05四聚體8
        mRFP158460750,0000.25單體37
        JRed58461044,0000.20二聚體26
        mCherry58761072,0000.22單體47
        HcRed158861820,0000.015二聚體1
        mRaspberry59862586,0000.15單體38
        dKeima-Tandem44062028,8000.24單體21
        HcRed-Tandem590637160,0000.04單體19
        mPlum59064941,0000.10單體12
        AQ14359565590,0000.04四聚體11

        GFP熒光蛋白在植物葉片上的表達

        GFP熒光蛋白在植物葉片上的表達(瀏覽更多熒光蛋白表達的效果

        上海峰志儀器銷售的熒光蛋白激發光源波段選擇指南

        指定激發發射適用于
        UV -  紫外線360 - 380nm415nm長波通Dapi
        VI -  紫羅蘭400 - 415nm450nm長波通藍色熒光蛋白
        青色熒光蛋白
        RB -  皇家藍440-460nm500nm長波通綠色熒光蛋白
        RB -  皇家藍440-460nm500 - 560nm帶通綠色熒光蛋白
        CY -  青色490 - 515nm550nm長波通黃色熒光蛋白
        GR -  綠色510 - 540nm600nm長波通紅色熒光蛋白

        http://www.sunkart.cn/laboratory/jifaguangyuan/LUYOR-3415RG.html 

        LUYOR-3415RG便攜式激發光源

        如果要觀察熒光蛋白(Fluorescent Protein)的表達,可以選擇美國路陽LUYOR-3415系列雙波長熒光蛋白激發光源。如希望提供更多詳細信息,可直接聯系上海峰志儀器有限公司的銷售客服。


        本文部分圖片和內容來自:https://www.luyoruv.com/news/news2/213.html 


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