sfGFP是superfolder GFP的縮寫,它是一種設計精良的折疊版本的GFP,對化學變性劑和極端溫度顯示更大的耐受力。Superfolder GFP是2005年發表的一種基本(構成熒光)綠色熒光蛋白,來源于Aequorea victoria。據報道,它是一種非??焖俪墒斓娜醵垠w。Superfolder GFP源自Folding Reporter GFP,具有以下突變:S30R/Y39N/N105T/Y145F/I171V/A206V
superfolder GFP的激發光和發射光:
sfGFP的激發光是·485nm,發射光為510nm
Superfolder GFP EX:485nm,Superfolder GFP EM:510nm
superfolder GFP的激發光和發射光的光譜圖
eGFP和GFP的區別:
GFP(綠色熒光蛋白)是一種在藍光或紫外光下發出綠色光的蛋白質。它天然存在于水母維多利亞水母中。GFP由238個氨基酸組成。GFP 的大小為 26.9 kDa。GFP 是分子生物學中的強大工具,因為它具有內在的熒光,沒有任何輔助分子。熒光是由于蛋白質的連續氨基酸的共價重排。蛋白質折疊后,主鏈原子 Ser65、Tyr66 和 Gly67 在 O 2存在下形成高度共軛的平面對羥基苯亞甲基咪唑啉酮發色團. 晶體結構研究表明,發色團填充在分子的 β-桶結構的核心內可防止其因順磁氧、水偶極子或順反異構化而猝滅。此外,發色團與相鄰分子的非共價相互作用增強了其光譜特性。
EGFP(增強型綠色熒光蛋白)是野生型 GFP 的變體,相對于 GFP 具有更高強度的發射。它是個也是重要的 GFP 變體之一。兩個突變 F64L 和 S65T 在 37 °C 下產生具有更高折疊效率的 EGFP。有趣的是,由于 S65T 對 395 nm 峰的抑制,EGFP 在 ~490 nm 處具有單個激發峰,因為它調節附近 Glu222 的電離狀態。另一方面,F64L 提高了 37 °C 時的折疊效率。重要的是,EGFP 的密碼子序列針對在哺乳動物細胞中的表達進行了優化。
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